摘要:目的探讨金钗石斛多糖对脑缺血-再灌注大鼠核因子KB(NF—KB)信号通路的调控机制。方法将90只sD大鼠按随机数字表法随机分为6组,分别为假手术组、模型组和金钗石斛多糖低剂量组(DL,50m∥蚝)、中剂量组(DM,100mg/k)、高剂量组(DH,200m∥kg)以及尼莫地平组(10m∥kg),每组15只,再按随机数字表法每组随机取5只供相应指标检测。采用大脑中动脉阻塞法建立sD大鼠局灶性脑缺血-再灌注模型,观察金钗石斛多糖对大鼠神经功能缺损(Bederson行为学评分)、脑含水量和脑梗死体积的改善作用。采用酶联免疫吸附法检测脑组织促炎因子肿瘤坏死因子-d(TNF-α)和白细胞介素-1p(IL-1p)水平,采用实时荧光定量多聚酶链反应(RT—qPcR)检测小胶质细胞标记物BcL乏相关蛋白A1d(A1)和星形胶质细胞标记物胶质细胞纤维酸性蛋白(GFAP)mRNA转录水平,蛋白免疫印迹法检测NF—KB信号通路磷酸化抑制蛋白(IKB仅)和胞核p65蛋白的表达水平。多组问计量资料比较采用单因素方差分析。结果(1)6组间大鼠神经功能缺损评分、脑含水量、脑梗死体积、脑组织TNF-a和IL—lB水平、A1和GFAPmRNA转录水平以及磷酸化IKBa蛋白和胞核p65蛋白水平差异均有统计学意义(,值分别为22.24、8.699、33.89、19.26、27.53、109.5、15.28、66.86、41.63,均P<0.01)。
       关键词:脑缺血-再灌注损伤;炎性反应;金钗石斛多糖;大鼠
       
       3讨论
       80%左右的缺血性卒中发生在大脑中动脉。本研究通过大鼠右侧MCAO和再通模型,模拟人类急性缺血性脑血管病后形成的局灶生脑缺血.再灌注。星形胶质细胞和小胶质细胞是脑组织固有的免疫细胞,在局灶陛脑缺血-再灌注后,它们激活成为介导炎f生反应所需要的效应细胞,Gn心和BCl-2相关蛋白A1仅(A1)被认为分别是星形胶质细胞和小胶质细胞激活的标记物,采用RT-qPCR法检测脑组织中GFAP和A1mRNA表达水平可以反映炎性反应细胞的活化程度,而TNF-仅和IL-1B则是脑缺血发生后脑组织最重要的促炎性反应因子。本研究显示,造模成功后24h,大鼠出现明显神经功能缺损症状,脑含水量和梗死体积等脑损伤指标明显增高,与此同时,脑缺血-再灌注脑区促炎因子TNF—d和IL-1B水平以及星形胶质细胞和小胶质细胞激活标志物GFAP和A1mRNA表达水平均明显升高,支持炎性反应促进脑梗死早期病情恶化的观点,提示抗炎性反应治疗是减轻脑缺血-再灌注脑损伤的有效措施。受研究条件所限,本实验仅设立了再灌注24h-个时间点,若在实验中设立多个时间点,可进-步观察脑缺血-再灌注后炎性指标的动态变化和相应的药物干预作用的趋势。