摘要:目的:探讨Pax6基因在视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,Rb)中的表达及临床意义。方法:选择我院2001-01/2012-12收存在眼科病理室的15例Rb组织切片设为观察组,再选取15例正常视网膜组织切片设为对照组。应用Western-Blot及RT-PCR(逆转录酶链反应)法分别对正常视网膜组织及Rb组织中的Pax6蛋白和Pax6mRNA的表达进行检测,同时应用Western-Blot法对Pax6基因下游的BRN3b及MATH5促分化基因在蛋白水平的表达进行检测,最后进行组间比较,进而对Pax6基因在Rb中的表达及临床意义进行探讨。结果:观察组Pax6基因mRNA表达平均值为0.99依0.03,Pax6基因蛋白表达平均值为2.07依0.15,BRN3b蛋白表达平均值为0.195依0.016,MATH5蛋白表达平均值为0.190依0.031,均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:异常表达的Pax6基因可能对Rb的出现起到促进作用。
       
       关键词:Pax6基因;视网膜母细胞瘤;表达
       
       
       3讨论
       迄今为止,Rb的发病机制尚未完全明确,在以往的研究中发现,Rb大部分起源于视网膜多克隆细胞混合体或者多能干细胞,经过诱导可以向视网膜细胞的多种类型方向进行分化[2]。因此,在某种意义上Rb细胞可以被认定为尚未定型的视网膜细胞。与此同时,研究还发现视网膜在发育过程中Rb的基因失活与母细胞瘤的发生密切相关,失活的Rb基因能够将限制细胞周期的作用解除,因而出现细胞增殖失控[3]。但随着医疗技术水平的发展,现在已认为对于其的发生并不是局限在单纯的基因失活方面,而且还存在其他的基因损伤而形成,在眼的发育中,Pax6基因具有严格的时空顺序在视网膜发育的过程中,是十分重要的调控基因,引起越来越多眼科研究者的关注[4]。
       在研究Rb时,有学者发现与细胞周期有关的调控蛋白出现了异常表达,说明细胞周期的异常调控与Rb的发生密切相关[5]。因此提示Pax6基因可能参与Rb形成的过程。结合本组研究表明,在Rb的肿瘤组织中检测到Pax6mRNA的表达,Western-Blot检测也表明有Pax6的蛋白表达,并且表达水平均高于正常视网膜组织。研究表明Pax6基因具有促进肿瘤细胞增殖和分化的作用,可能是通过对于BRN3b和MATH5基因表达的调控实施的,BRN3b蛋白和MATH5蛋白在视网膜神经节细胞的分化过程中形成,为标志蛋白。