摘要:目的观察牛蒡子苷元(ARG)对大鼠脑胶质瘤细胞株C6增殖及其瘤体生长的抑制作用。方法常规培养C6细胞,分别加入不同浓度0.1、0.3、1.0、3、10、30、100、300μmol/L的ARG作用48h,采用MTT法测算细胞增殖抑制率及ARG的半数抑制浓度(IC50)。将C6细胞悬液注入SD大鼠脑组织制备脑胶质瘤模型,将模型随机分为ARG低、高剂量组及替莫唑胺(TMZ)组和对照组;ARG低、高剂量组于C6细胞移植后第2天分别给予0.1、0.3mg/kgARG皮下注射,1次/d,连续给药16d;TMZ组于C6细胞移植后第5天给予20mg/kgTMZ灌胃,1次/d,连续给药5d;对照组给予相应的溶媒。C6细胞移植后第17天测算脑胶质瘤体积及抑瘤率;取小鼠肿瘤组织,HE染色后观察肿瘤病理形态;计算小鼠脾脏指数、胸腺指数并进行外周血常规检查。结果0.1、0.3、1.0、3、10、30、100、300μmol/L的ARG对C6细胞的增殖抑制率分别为19.2%、32.6%、47.5%、43.1%、42.8%、48.0%、57.4%、84.4%,药物浓度越高细胞增殖抑制率越高(P<0.05);ARG的IC50为67.8μmol/L。ARG低剂量组、ARG高剂量组、TMZ组脑胶质瘤体积与对照组比较,P均<0.05;ARG低剂量组抑瘤率与ARG高剂量组比较,P<0.05。对照组大鼠肿瘤细胞布满整个视野,呈浸润性增长;ARG低、高剂量组肿瘤细胞排列致密程度较对照组稀疏,与TMZ组一致。ARG低、高剂量组胸腺指数、血小板计数及血小板压积与TMZ组比较,P均<0.05。结论牛蒡子苷元可抑制大鼠脑胶质瘤细胞增殖及其瘤体生长,且对机体免疫器官及血小板水平无明显不良影响。
       
       关键词:脑胶质瘤;牛蒡子苷元;脑胶质瘤细胞株C6;大鼠
       
       
       3讨论
       胶质瘤是最常见的颅内原发性肿瘤,呈浸润性、扩展性生长,手术难以根除,且多数胶质瘤对放射线不敏感,目前缺乏满意的治疗手段。因此,如何有效地控制胶质瘤是亟待解决的问题。一般认为恶性胶质瘤预后效果不理想的原因主要有两方面:①一般药物难以通过血-脑脊液屏障,无法达到有效治疗浓度;②化疗药物如TMZ,会对机体内增殖旺盛的细胞造成损伤,不良反应(机体功能衰弱、骨髓抑制、消化障碍,对重要器官心、肝、肾、肺和神经系统的毒性,免疫功能低下和致畸变、突变)大,严重影响患者生存质量,患者难以长期坚持应用。药物治疗脑胶质瘤的关键是使用小分子结构的药物。能够通过血-脑脊液屏障直接作用于肿瘤细胞。同时药代动力学实验证实给药0.25、1h后,ARG的脑内通过率分别为9.63%、3.28%。本研究结果表明,ARG不仅有效抑制大鼠脑胶质瘤细胞C6的体外生长(IC50为67.8μmol/L),且抑制胶质瘤体内生长,抑瘤率达49.08%。随ARG浓度的升高,C6细胞增殖抑制率增大。而通过观察ARG对大鼠脑胶质瘤的抑制作用发现,低剂量ARG对脑胶质瘤的抑制作用最强,高剂量ARG对脑胶质瘤的抑制作用反而不如低剂量。本研究体内外实验结果不一致,可能是因为ARG在体内抑制脑胶质瘤生长的作用途径及作用机制比体外研究更为复杂。本研究结果表明,ARG对胶质瘤大鼠的胸腺指数、脾脏指数及血液成分(红细胞、白细胞、血小板)均无影响,证明其安全性较高。另外,ARG对重要器官如心、肝、肾及神经系统等均无毒性[8,9]。提示ARG比TMZ的不良反应小,且可能通过改善身体的免疫功能来抑制肿瘤生长。