关键词:肾脏;石蜡切片;Masson;染色

     

    物品准备:二甲苯、不同浓度梯度的酒精、酸性品红、丽春红、苏木素、三氯化铁、磷钼酸、磷戊酸、ddH2O、苯胺蓝、冰醋酸、烧杯、量筒、染色盒、中性树胶

    6.2 主要溶液配制

    酸性品红-丽春红染液:2.7g丽春红,0.3g酸性品红,溶于200ml ddH2O中,加入3ml冰醋酸,ddH2O定容至300ml。

    Weiger’s铁苏木素:I液:5.0g苏木素,500ml 95%酒精

    II液:20ml 29%三氯化铁,ddH2O 475ml,浓盐酸 5.0ml 注:A液和B液分别配制好后,可保存一年,用前再将两者1:1混合,混合液室温保存3-4天有效。

    2.5%磷钼酸-磷戊酸染液:5g磷钼酸,5g磷戊酸,加入150ml ddH2O中,待其完全溶解后定容至200ml。

    苯胺蓝染液:5g苯胺蓝溶于100ml ddH2O中,加入1ml冰醋酸,完全溶解后定容至200ml。

    1%冰醋酸:2ml冰醋酸,ddH2O 200ml。

    6.3 Masson染色步骤

    1)石蜡切片脱蜡至水步骤同PAS染色;

    2)各取5ml Weiger’s铁苏木素I和II液,配制10ml工作液,滴在组织上染色5min;

    3)自来水反蓝10min(必要时1%盐酸酒精分化),ddH2O浸润切片30s;

    4)酸性品红-丽春红染液浸染5-10min;

    5)自来水冲洗切片片刻,ddH2O浸润切片30s;

    6)2.5%磷钼酸-磷戊酸染液浸染15min;

    7)直接快速将切片放至苯胺蓝染色中,染色15min;

    8)1%冰醋酸浸泡1-2s;

    9)无水乙醇脱水-二甲苯透明-中性树胶封片。