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香烟烟雾激活肺癌细胞wnt/β一catenin 信号途径的机制研究
发布时间:2019-06-12 13:48:22| 浏览次数:
TAG: 巨噬细胞 肺癌 肿瘤坏死因子a wnt邝一catenin信号通路


       [摘要] 背景与目的:香烟烟雾诱导的炎性反应可显著促进肺肿瘤的生长,本研究通过体内外实验明确 香烟烟雾激活肺癌细胞wnt/D—catenin信号途径的机制。方法:利用尾静脉注射鼠Lewi s肺癌细胞方法建立小鼠 肺癌模型,然后采用香烟烟雾对其进行刺激,诱发炎性反应。免疫组化方法检测小鼠和人肺肿瘤组织中CD68、 肿瘤坏死因子Ⅱ(tumor necrosis factor alpha,TNF一a)和无磷酸化D—catenin的表达。采用Transwell勺番入式 细胞培养皿共培养人巨噬细胞和人肺癌细胞株A549细胞。采用蛋白质印迹法(western blot)检测A549细胞中无 磷酸化p—catenin的表达及磷酸化的GsK一3p和Akt蛋白的表达。结果:免疫组化结果显示,香烟烟雾刺激肺肿瘤 负荷小鼠后,其肿瘤组织中巨噬细胞CD68+、TNF-Ⅱ和无磷酸化6一catenin的表达均明显高于对照组。肺癌患者 肿瘤组织中,cD68和TNF一a的阳性表达均明显高于正常组织。肺腺癌和鳞癌的无磷酸化B—catenin的染色阳性 率分别为68.9%和62.2%,其阳性率与患者吸烟与否及肿瘤分期有关,差异有统计学意义(P均<0.05),并且 cD68+的细胞数在无磷酸化B—catenin染色阳性的标本中显著升高(P<0.01)。western blot检测结果显示,不 同浓度香烟抽提物(cigarette smoke extract,csE)刺激共培养细胞后,A549细胞中无磷酸化6一catenin的表 达随着csE浓度的增加而显著上升。在加入TNF—a中和抗体后,A549细胞中无磷酸化B—catenin的表达被抑制。 用TNF—a处理A549细胞后,磷酸化的GsK一3p和Akt蛋白在2 h后表达增加,4 h后无磷酸化p~catenin蛋白表达也开 始上调。结论:香烟烟雾诱导肺肿瘤组织中巨噬细胞释放炎性反应因子TNF一Ⅱ,进而通过Akt/GSK一3B途径激活 肿瘤细胞中wnt邝一catenin信号通路。
       [关键词] 巨噬细胞;肺癌;肿瘤坏死因子a;wnt邝一catenin信号通路
       
       3讨 论 香烟作为导致肺癌的重要因素已被人们熟知,而其具有的促进肿瘤生长的特性,目前也已被包括多项研究证实。前期研究表明在采用注射肿瘤细胞、化学致癌物NNK或K—r口s转基因小鼠等方法导致的肺癌小鼠模型 中,香烟烟雾的刺激显著增加了肺肿瘤的生长。有研究显示,香烟烟雾刺激产生的炎 性反应被认为可能关联到肺肿瘤的生长。 通过敲除小鼠髓系细胞p65或IKKD阻断炎性反 应免疫细胞的NF—KB信号途径,显著抑制香烟 烟雾诱发的小鼠肺部炎性反应,导致小鼠肺 肿瘤生长阻滞心。本研究结果发现,大量的 巨噬细胞浸润到小鼠肺肿瘤组织中,并且浸 润到肿瘤组织的炎性反应细胞表达高浓度的 TNF一仪,特别是当小鼠经过香烟烟雾刺激后, TNF.仅的表达进一步增加。在巨噬细胞中, TNF一仅表达主要由NF—KB途径控制,是巨噬细胞 分泌的主要炎性细胞因子。wnt/6一catenin是胚胎肺组织发育的重要信 号途径,是wnt蛋白家族的经典信号途径,它 的激活需要依赖细胞质中B—catenin蛋白的磷酸化。
 
 
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