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VicK激酶活性对变异链球菌的生物学影响
发布时间:2019-05-15 14:08:58| 浏览次数:
TAG: 变异链球菌双组 分信号传导系统VicK 生物学作用


       【摘要】:目的研究VicK蛋白的激酶活性对变异链球菌(S.mutans)生理及毒力因子的调控作用。方法使用PCR连接突变技术构建vicK基因敲出株,利用质粒搭载、表达VicK激酶活性废除蛋白。研究实验株菌落形态、隔夜培养菌液的变化、生物膜形成以及生物膜形成相关重要基因转录水平的改变。结论VicK的激酶活性对变异链球菌正常生长、生物膜形成及与编码生物膜形成相关蛋白基因的表达起着重要的调节作用。
       
       【关键词】:变异链球菌双组,分信号传导系统VicK,生物学作用
       
       3讨论
       最近VicK蛋白晶体结构被解析,体外激酶活性实验证明位于DHp结构域上的His217为VicK上用于接受磷酸基团的保守组氨酸,当它被丙氨酸取代后,VicK蛋白失去其激酶活性,但其磷酸酶活性没有明显变化。基于这一特点,本研究运用基因定点突变的方法,对VicK蛋白上用于接受磷酸基团的保守组氨酸进行了丙氨酸的置换(H217A),从而针对性地废除了其激酶活性,并对它对变异链球菌产生的影响进行了一般生物学表型及基因转录水平的分析。菌落形态、过夜培养菌液状态以及生物膜相关基因转录水平研究发现,VicK激酶活性废除株(VicKH217A)与野生株UA159之间存在着明显的差异,而与ΔVicK十分相似。与此同时,VicKH217A与VicK磷酸酶活性缺失时的表型明显不同(未公布数据),这些结果均提示VicK的激酶活性在维持变异链球菌正常生理活动中发挥着重要作用。
 
 
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