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冬凌草甲素对甲状腺癌BCPAP细胞增殖的抑制作用
发布时间:2019-04-15 14:03:47| 浏览次数:
TAG: 冬凌草甲素 甲状腺癌 BCPAP 细胞增殖 细胞凋亡

    [摘要]目的研究冬凌草甲素对甲状腺癌BCPAP细胞增殖的抑制作用。方法使用0、0.5、1、2、5、10、20、50、100μmol/L浓度的冬凌草甲素处理甲状腺癌细胞株BCPAP 48 h后,用CCK8测定细胞增殖率,绘制增殖曲线,计算细胞半数抵制率(IC50)。实验组加入接近IC50浓度(10μmol/L)的冬凌草甲素,对照组细胞正常培养36 h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡,利用Western blot检测凋亡基因PARP、Erk1/2和p-Erk1/2蛋白的表达。结果冬凌草甲素能显著抑制BCPAP细胞增殖,在2~20μmol/L时,具有明显的量效关系。流式细胞术检测发现,与对照组相比,实验组细胞早期凋亡率(2.83±0.70)%,晚期凋亡率(1.43±0.31)%,总凋亡率(4.27±1.01)%,均明显升高(P0.05)。Western blot发现,剪切后的PARP及p-Erk蛋白的表达水平分别上调了1.5倍和1.8倍,上调显著(P值均0.05)。结论冬凌草甲素可抑制甲状腺癌细胞株BCPAP增殖,其可能与诱导细胞凋亡有关。

     

    [关键词]冬凌草甲素;甲状腺癌细胞株BCPAP;细胞增殖;细胞凋亡

     

     

    3讨论

    冬凌草甲素是植物冬凌草中的一种四环二萜化合物,是冬凌草中的主要活性成分。近年来中药活性成分治疗肿瘤成为研究的热点之一。已有许多文献报道冬凌草甲素对多种肿瘤具有杀伤作用,但是它对于甲状腺癌的作用还无从得知。本研究发现冬凌草甲素可显著抑制甲状腺癌BC·PAP细胞株的增殖,诱导其凋亡。

       本研究采用不同浓度的冬凌草甲素作用于BCPAP细胞48h,发现浓度在2~20I山mol/L时,随着浓度的增加,冬凌草甲素对BCPAP的增殖抑制作用增强,具有明显的浓度依赖性。采用接近IC的浓度(10I-Lmol/L)进行后续研究,探讨冬凌草甲素抑制细胞增殖的机制。

    本研究采用流式细胞术AV—PI双染的方法检测了冬凌草甲素作用于甲状腺癌细胞株BCPAP36h后细胞凋亡比率。结果发现,与对照组相比,实验组细胞凋亡比例显著升高,尤其早期凋亡的比例更为显著,这提示冬凌草甲素可能是通过诱导细胞发生早期凋亡来抑制增殖。本研究利用westernblot检测了冬凌草甲素作用后,凋亡相关蛋白及通路核心分子的变化。结果表明冬凌草甲素的加入明显上调了被剪切PARP及P—Erk的蛋白水平,而并不改变totalErk的蛋白表达,这与Erk磷酸化之后发挥信号转导作用是一致的。这一结果有助于进一步探讨其作用机制。

    总之,本研究显示冬凌草甲素可抑制甲状腺癌BCPAP细胞增殖,其机制可能是通过诱导细胞凋亡。今后将进一步深入探讨其对肿瘤抑制作用的机制和对细胞周期的影响,为甲状腺癌的临床治疗提供实验基础。


 
 
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