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UUO术后小鼠取肾脏组织
发布时间:2019-04-22 11:32:49| 浏览次数:
TAG: 术后 小鼠 肾脏 组织

    关键词:术后;小鼠;肾脏;组织

    3.1 物品准备:70%酒精、1ml注射器、10ml注射器、1%戊巴比妥钠、500ml预冷PBS、肝素、眼科镊、眼科剪、显微镊、显微剪、10cm培养皿、刀片、滤纸、组织包埋框、OCT包埋剂、4%多聚甲醛固定液、锡纸、组织冻存管液氮。

    3.2 取肾脏组织过程

    1)小鼠腹腔注射 10ml/g小鼠体重的1%戊巴比妥钠麻醉小鼠;

    2)用眼科镊夹起小鼠腹部皮肤,眼科剪迅速打开小鼠腹腔和胸腔,充分暴露小鼠心脏,再用显微剪将小鼠右心耳剪破,用10ml注射器吸满预冷PBS,从小鼠心尖进针,缓慢地将PBS推进心脏,待肝脏变白后停止灌注;

    3)找到左肾,先用显微镊小心剥离肾脏包膜后,去除肾盂结缔组织,然后剪下完整的左侧肾脏;

    4)迅速地将肾脏组织转移至预冷的PBS中,然后用刀片将肾脏分为四部分,1/4肾 脏(上极腹侧)作蛋白质提取;1/4肾脏(上极背侧)作mRNA的提取,二者借用锡纸包好放入组织冻存管暂放液氮,之后转到-80℃冰箱冻存;1/4肾脏(下极腹侧)用滤纸吸干水分,放入包埋框后置4%多聚甲醛固定作石蜡包埋;1/4肾脏(下极腹侧)用滤纸吸干水分后,用O.C.T.冰冻包埋剂包埋后放入暂放入液氮,之后转至-80℃冰箱长期冻存。 


 
 
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