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RNA纯化
发布时间:2019-04-10 12:01:33| 浏览次数:
TAG: RNA纯化

    关键词:RNA纯化

    用反转录试剂盒中的gDNA Eraser(TaKaRa code DRRO47A)对RNA中残留的基因组DNA 进行纯化处理。实验操作严格按说明书进行,具体

    步骤如下:将表中各组分加入反应管内:试剂使用量

    5×gDNA Eraser buffer 2μl

    gDNA Eraser 1μl

    Total RNA 5μl

    RNase-Free water 2μl

    Total 10μl

     

    2.7.3 RNA 纯度检测和定量测定

    应用Nanodrop2000 超微量分光光度计,测定RNA 浓度。同时检测RNA 的质量,根据蛋白质在280nm 附近有强吸收,核酸在260nm 附近有强吸收,利用此性质使用Nanodrop2000 测定RNA 的A260/A280 的比值,理想的RNA 纯度A260/A280 应在1.9-2.1 范围之间。

    2.7.4 RNA 电泳检测RNA 质量

    5μl RNA 和1μl 的6xRNA 上样缓冲液混匀,用含有EB 的1%琼脂糖凝胶进行电泳用来检测RNA 的完整性。电泳后紫外光下可见两条主要的条带:28s 和18s,前者大概是后者密度的两倍,且无明显杂带,表示RNA 完整无降解。

     


 
 
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